生物實驗植物組織培養(yǎng)
來源:學(xué)大教育 時間:2013-09-01 21:39:42
高中生物實驗當中,有許多實驗是我們必須要掌握的,今天全國一對一家教資深生物老師就為大家介紹一個我們需要掌握的生物實驗植物組織培養(yǎng),先從如何配制母液開始吧!
實驗室的準備工作
本實驗需要作好三項實驗準備:一是提前配制各種母液;二是提前準備MS培養(yǎng)基;三是選擇外植體并進行預(yù)處理。卓越教育小編整理了相關(guān)資料,以供參考:
1.1配制母液
母液中含有大量元素、微量元素、激素(植物生物調(diào)節(jié)劑)和維生素等有機成分,母液濃度是實際溶液濃度的5~10倍。配制母液花費時間多,需要用到溶量瓶、移液管等精密儀器,無法由每位學(xué)生親自操作,教師可帶領(lǐng)部分學(xué)生在課外進行。母液的類型和配制順序如下:
配制母液的注意事項:⑴自來水或河水中含有大量的礦質(zhì)元素,勿用配制母液;⑵配制大量元素和微量元素母液時,應(yīng)將每種化合物單獨溶解后,再一一混合,同時還應(yīng)用適量的蒸餾水清洗燒杯內(nèi)壁,并將清洗后的蒸餾水倒入混合溶液中,這樣可以保證每種元素的濃度,混合時要按照教材附表中的順序進行,最后加入的是氯化鈣溶液,這樣可以避免發(fā)生沉淀;⑶配制好的母液要先倒入1000ml燒杯中,再由燒杯轉(zhuǎn)入1000ml細口瓶中,不可由容量瓶直接倒入細口瓶中;⑷注意觀察母液中是否有絮狀物,出現(xiàn)絮狀物表明離子之間發(fā)生反應(yīng),需要重新配制母液;⑸植物生長調(diào)節(jié)劑難溶于水,需要堿或酸助溶,一般生長素類物質(zhì)用堿(0.1mol/LNaOH1~3ml)或酒精(75~95%的酒精1~3ml)助溶,細胞分裂素類物質(zhì)一般用酸(0.1mol/LHCL1~3ml)助溶,加入蒸餾水定溶時要緩慢,也可用水浴法助溶;⑹用棕色細口瓶盛裝有機物母液和植物生長調(diào)節(jié)劑母液,避免透射光損害母液中的有機成分;⑺在瓶壁上貼好各種母液的標簽(下圖所示);⑻將配制好的母液放入冰箱中或陰涼處保存。
MS是穆拉希吉(Murashige)和斯庫克(Skoog)兩位科學(xué)家第一個字母的縮寫,他們于1962年為培養(yǎng)煙草而設(shè)計了一種培養(yǎng)基,這就是組培使用中最為廣泛的MS培養(yǎng)基;標簽中間一行的數(shù)字及單位表示的意義如下,例如,100ml/L,即配制1升培養(yǎng)基只需從母液中提取100ml即可;50mg/100ml,表明100ml母液中含有50mg萘乙酸,如取4mg的萘乙酸,只需提取8ml母液。
除母液需提前配制好外,消毒液也需要提前配制好。外植體消毒一般采用75%的酒精、2~10%的次氯酸鈉溶液等。
做好了母液的配制工作之后,才能進行下一步的實驗,所以說,母液對這個實驗的重要性就可想而知了,希望以上我們?nèi)珖?a target="_blank" title="學(xué)大教育">學(xué)大教育網(wǎng)為大家講解的配制母液的方法,能夠幫助到想要學(xué)好生物的同學(xué)們!
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